WEB-ресурс научно-практических конференций

Пагер О.М., Смаглій I .І., к.т.н . Тодосійчук Т.С.

НТУУ « Київський політехнічний інститут » , Україна

БАКТЕРІОЛІТИЧНА СПЕЦИФІЧНІСТЬ ОКРЕМИХ КЛОНІВ КУЛЬТУРИ STREPTOMYCES RECIFENSIS VAR . LYTICUS

Ферментні препарати широко застосовуються в різних галузях промисловості, медицини та народного господарства. Більшість з них отримується мікробним синтезом, тому відбір нових продуцентів ферментів або підвищення активності відомих є актуальним завданням сучасної біотехнології. Серед ферментів різної специфічності останнім часом зростає потреба у літичних (або бактеріолітичних ) ензимних препаратах, що здатні руйнувати мікробну клітину, а отже мають потенціал як протимікробні засоби [1; 2].

Ферментний комплекс такої специфічності продукує штам Streptomyces recifensis var . lyticus 2435/М. До його складу входять глікозидази , літичні ендопептидази , мурамідази , протеїнази та амілази, комплексна дія яких призводить до руйнування широкого спектру мікробних культур [3; 4]. На основі даного штаму розроблено технологію бактеріолітичного ферментного препарату Циторецифен , однак використання продуценту передбачає постійну селекційну роботу по підтримці та підвищенню його біосинтетичної здатності.

Тому, завданням представленого дослідження є встановлення гетерогенності популяції Str. recifensis var . lyticus 2435/М за рівнем літичної ( бактеріолітичної ) активності з метою подальшої селекції окремих високоактивних штамів із заданою специфічністю.

Для визначення бактеріолітичної активності окремих клонів використовували грампозитивні та грамнегативні тест-культури Staphylococcus aureus , Lactobacillus delbrueckii var . bulgaricus та Escherichia coli , відповідно, які вносили у щільне поживне середовище Чапека. Бактеріолітичну активність кожного клону визначали за відношенням діаметрів зони лізису тест-культур та самої колонії і характеризували індексом літичної активності (ІЛА) [5].

Наведені на рисунку дані свідчать про суттєву різницю бактеріолітичної активності окремих клонів досліджуваного штаму не лише по відношенню до грамнегативних та грампозитивних культур, а й в межах однієї групи мікроорганізмів.

Рис. 1. Динаміка бактеріолітичної специфічності популяції штаму Str . recifensis var . lyticus 2435/М

Так, ІЛА одних і тих самих клонів по відношенню до L. bulgaricus були в середньому удвічі нижчі, ніж по відношенню до інших тест-культур і почали визначатися лише з 4 доби. Це свідчить про затримку у біосинтезі та зниженій кількості окремих ферментів комплексу штаму (очевидно бактеріолітичних пептидаз ), що відіграють визначальну роль у деградації клітинної стінки L. bulgaricus .

Слід зазначити, що досліджуваний штам раніше був селекціонований саме за переважаючою стафілолітичною активністю, тому високі ІЛА ( > 4) по відношенню до цієї культури вказують на високу стабільність набутої ознаки. [ 5 ] Однак, раніше штам не визначався високою активністю по відношенню до грамнегативних культур. Вірогідно, встановлена висока літична активність по відношенню до E . coli (ІЛА = 4) є наслідком мінливості культури щодо синтезу компонентів комплексу, здатних руйнувати клітинну ст інку грамнегативних організмів.

За результатами проведеного дослідження можна зробити наступні висновки:

1.Бактеріолітична специфічність окремих клонів та популяції штаму Str . recifensis var . lyticus 2435/М загалом суттєво розрізняється в межах виду мікробних культур, тому, очевидно, не можна прогнозувати високу активність штаму по відношенню до всієї певної групи культур, якщо вона визначається щодо окремого представника групи.

2.Селекційна даного штаму може бути спрямована як на отримання продуценту з високою активністю щодо однієї культури, а також щодо групи культур (наприклад, типового складу мікроорганізмів окремих захворювань тощо).

Список літератури:

1. Лукашева Е.В., Трешалина Е.М., Березов Т.Т. Перс п ективы использования ферментов в терапии // Материалы конгресса « Биотехнология: состояние и перспективы ». – М., 2005. – 166 с.

2. Афиногенов Г.Е. Принципы антисептики в системе борьбы с раневой инфекцией // Стратегия и тактика применения антисептиков в медицине: Материалы междунар . конф . – Винница , 2000. – С. 267.

3. Шинкаренко Л.М., Жолнер Л.Г., Тодосійчук Т.С. Визначення спектра дії ферментного препарату з Str . recifensis var . lyticus 2435/М // Експрес-новини: наука, техніка, виробництво. – 1998. – №4. – С. 49.

4. Тодосійчук Т.С. Розробка технології гідролітичного ферментного препарату циторецифен : автореф . дис на здобуття наук. ступеня канд. техн. наук: спец. 03.00.20 «біотехнологія» . – К., 2000. – 25с.

5. Тодосійчук Т.С., Шинкаренко Л.М., Федоренко В.О., Басілія Л.І. Отримання мутантів Str . recifensis var . lyticus зі зміненою бактеріолітичною активністю // Мікробіол . журн.– 1998. – №4. – С.49–56.