WEB-ресурс научно-практических конференций

ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ФЛАРАКСИНА НА НАЧАЛЬНЫХ ЭТАПАХ СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ

А. В. Артемов, В. В. Россихин, Ю. А. Илюхин, П. Г. Осипов

Флараксин является биофлавоноидным комплексом   на основе галловой кислоты (таннин) и йодистого калия. Одним из механизмов такого действия, как показали наши предыдущие исследования, является влияние на тиол-дисульфидные связи протеинов. Происходящее при этом изменение белкового редокс-потенциала, сопровождается конформационными изменениями белков, и в частности, связанных с процессами иммуногенеза и онкогенеза.

Итогом этих изменений, как показали клинические наблюдения, является повышение цитостатической активности клеток иммунной системы и активация апоптоза опухолевых клеток.

Кроме этого, известно, что биофлавоноиды обладают антиоксидантным свойством.Однако антиоксидантная активность флараксина специально не изучалась.

Механизм свободно-радикального окисления и связанная с ним антиоксидантная система рассматриваются как важнейшее патогенетическое звено многих патологических процессов. От этого механизма в значительной степени зависит структурно-функциональная целостность клеток и тканей организма, что напрямую сопряжено с процессами старения и опухолевой трансформации.

Свободно-радикальное оксиление обусловлено активными формами кислорода, образующимися в результате ферментативной деятельности оксидоредуктазы. При этом образуются ионы кислорода (02    ) и перекись водорода (Н2О2).

Определенную роль в этом процессе играет аутоокисление катехоламинов. Механизм повреждающего действия реализуется через взаимодействие ионов кислорода и перекиси водорода с образованием гидроксильных радикалов   и свободного кислорода . Это приводит к инактивации различных белков, деструктивным изменениям полисахаридов и стимуляции мутагенеза за счет повреждения ДНК.

Активные формы кислорода инициируют перекисное окисление жирных кислот и их дериватов, что приводит к образованию карбонильных соединений, связывающихся с нуклеиновыми кислотами и белками. Как видно, антиоксидантная защита может стать важным фактором на пути мутагененных изменений , ведущих к образованию неопластических клеток и опухолевой прогрессии .

С целью воздействия на свободно-радикальное окисление в последнее время стали применять антиоксиданты в лечении ишемических заболеваний различной локализации. Широкое применение нашли такие вещества с антиоксидантной активностью, как а-токоферол, дибунол, оксипиридины.

Однако многие известные антиоксиданты имеют серьезные недостатки: они действуют лишь на конечном этапе свободно-радикального окисления, а при разложении свободных радикалов полиненасьпценных жирных кислот образуют токсичные продукты ( ).

Клиническая апробация   флараксина показала наличие у него противоопухолевых, антивирусных и иммуномодулирующих свойств( ).

Представляет интерес оценка антиоксидантной активности препарата, учитывая что свободно-радикальное окисление играет важную роль в онкогенезе. Надо также отметить, что изучение свободно-радикальных повреждений и разработка антиоксидантной защиты в процессе   химиотерапевтического лечения онкологических больных уже привлекло внимание онкологов ( ). Мы полагаем, что роль антиоксидантов не менее важна также для профилактики ранних и поздних рецидивов, т.е. как лекарственных средств сопровождения адъювантной и неоадъювантной терапии.

В данной работе нами использован усовершенствованный метод оценки антиокислительной активности антиоксидантов на начальных этапах свободно-радикального оксиления по ингибированию супероксид-радикала в реакции аутоокисления адреналина в адренохром в щелочной среде.

Материал и методы

В кювету 10 мл спектрофотометра СФ-26 вносили 2.0 мл 0,15 М натрий-карбонатного буфера с добавлением Зх10-4 мл ЭДТА (рН 10,2), затем прибавляли растворы исследуемых препаратов. Реакцию начинали прибавлением 0,4 мл 2,25 х 10- ³ М водного раствора адреналина.Исходный кристаллический адреналин растворяли в дистиллированной воде и доводили разбавленной хлороводородной кислотой до рН 2,25. Сначала определяли показатель экстинкции (Е1),отражающийскорость ингибированияаутоокисления адреналина, а затем показатель экстинкции (Е2), отражающий скорость аутоокисления адреналина в присутствии исследуемьк препаратов. Реакцию проводили при температуре 35-36 гр.С, в спектрофотометре СФ-26 при длине волны X — 480 нм, время экстинкции – 3 мин. Антиокислительную активность исследуемых препаратов выражали в процентах ингибирования аутоокисления адреналина и вычисляли по формуле: ( E 1 – E 2 )    / Е1 * 100.      

Результаты и обсуждение

В данной работе для оценки антиоксидантной активности по ингибированию супероксид-радикала в реакции аутоокисления адреналина в адренохром нами использован препарат флараксин

В качестве препаратов сравнения взят известный препарат антиоксидантного действия а-токоферол и диметилсульфоксид, являющийся одним из наиболее сильных реактиваторов супероксидцисмутазы, а также два хелатных соединения ртути : с цистеином (Меркурид Ц) и с метионином( Меркурид М).

Результаты исследования представлены в таблице 1.

Таблица 1. Сравнительная антиокислительная активность флараксина и некоторых антиоксидантов ( М+м; n = 10)

•     Различие достоверно по сравнению с контролем,р < 0,001

Анализ представленных данных позволяет говорить о наличии выраженной антиоксидантной активности у флараксина. Причем эта активность значительно выше, чем у известного антиоксиданта а-токоферола и реактиватора супероксидцисмутазы диметилсульфоксида.

Литература:

1. Бойцова Л.В. Изменение антиоксидантной системы глутатиона как показатель цитотоксического действия платидиама//

2 .Дунаев В.В., Беленичев, И.Ф.Коваленко СИ. и др. Антирадикальная и антиокислительная активность производных 1,2,4- триазола и хиназолина при ишемии головного мозга.// Укр.биохим.журн.,1996,-т.68.-№1 .-с.100-103.

3. ЗайцевВ.Г.,Закревский В.И. Защита клеток от экзогенных и эндогенных активных форм кислорода: методические подходы к изучению// Фундаментальные и прикладные аспекты современной биохимии. Труды научной конференции , посвященной 100-летию кафедры биохимии Санкт-Петербургского медицинского университета им.акад. И.П.Павлова.С-Пб,15-17 октября 1998 г.,С-Пб,1998.-т.2.-с.401-405

4. Коровина Н.А., Захарова И.Н., Обыночная Е.Г. Применение антиоксидантов в педиатрической практике.// Consilium medicum .,2003.- T .5.-№9.